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表面等离子体共振仪(SPR)
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表面等离子体共振仪(SPR)


品      牌:Affinite

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型      号:SPR

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表面等离子体共振仪(SPR)

应用1:蛋白质-抗体相互作用

1.1 介绍

免疫检测通常用于检测临床研究、诊断试验和学术研究等领域生化标志物的存在和水平。目前有很多免疫检测法,但它们都依赖于抗体与其靶蛋白的特异性结合作用。抗体-蛋白结合动力学和强度携带着系统的特有信息,这些关键信息可以通过SPR的免疫检测格式收集。

SPR是一种强大的分析技术,可以快速地进行蛋白质组研究和药物发现,但它的高成本和复杂性限制了其在学术机构中的应用。

1.2 Affinité P4 SPR

Affinité P4 SPR通过使用简单、低成本和易于操作的设备使得该技术能够推广开来,并且降低了SPR的应用障碍。

紧凑型P4 SPR(占地面积相当于一本书)可以轻松地安装在实验台上,并在几分钟内由任何人(本科生到宇航员,高级化学家到业余科学家)操作。此款P4 SPR的强大设计提供给我们从几分钟到几小时独特且灵活的检测时间,以此适应广泛的生物分子相互作用动力学。

Affinité技术已通过前列腺癌(PSA /抗PSA)、酶检测(β-内酰胺酶)和免疫球蛋白等的一系列蛋白-抗体相互作用的验证,并且适用于无标记格式的ELISA分析。我们的防垢技术能够在包括血清和血浆在内的复杂生物流体中提供高信噪比,能够充分满足您的蛋白质-抗体相互作用的监测需求。

1.3 分化抗原64(CD64)/lgG Fab

       Fab修饰的SPR芯片上CD64的滴定曲线

 

关键的实验步骤:

Affinité的肽SPR芯片

EDC/NHS交联

PBS 1×pH 7.4缓冲液

应用2:蛋白质-核酸相互作用

2.1 介绍

DNA、RNA和PNA等核酸可以采用同蛋白质活性位点相结合的活性结构。与蛋白质-抗体结合类似,蛋白质-核酸(NA)的结合也能够表现出不同的亲和力,而这种亲和力可以通过改变NA序列来调节。设计一个NA序列,从而达到与靶蛋白的特异亲和力范围,这种筛选策略被应用于个性化医疗等新兴领域。SPR是一种强大的无标记技术,能够提供蛋白质-NA结合动力学数据,从而应用于了解和调节核心细胞过程(如转录调控)的学术和临床研究。

2.2 Affinité P4 SPR

Affinité的P4 SPR具有一种独特的方法,用来鉴定DNA上的结合配偶体,定量靶蛋白,并确定结合亲和力和结合动力学。简单的NA固定技术和易于操作的仪器设备,令上述方法能够让任何人(本科生到宇航员,高级化学家到业余科学家)在短短几分钟的培训时间里轻松领悟。

Affinité技术已经实现了对蛋白质-DNA相互作用的成功测定。在该项测试中,双链DNA片段被杂交在SPR芯片上。我们通过一种无标记方法检测到DNA与可溶性蛋白质之间的相互作用,该方法适用于任何巯基修饰的核酸链的检测。

2.3 Lacl 阻遏蛋白/双链DNA

利用双链DNA分步感测蛋白质

 

 关键的实验步骤

 Affinité的肽SPR芯片

 巯基修饰的寡核苷酸

 PBS 1×pH 7.4缓冲液

应用3:药物-受体相互作用

3.1 介绍

小型治疗药物(500-1000Da)是一种可能有助于调节生物过程的化合物,而且大部分治疗药物都属于这一类。表征小型治疗药物与其受体之间的相互作用是非常具有挑战性的,这是因为标记可以干扰相互作用,而无标记技术则受到了小分子量的挑战,但无标记表征却是药物筛选和药物选择性测定的关键。尽管存在潜在挑战,SPR仍能够实时监测药物-受体之间的相互作用。

3.2 Affinité P4 SPR

Affinité的P4 SPR具有一种独特的方法,用来识别小型治疗药物的结合配偶体并确定结合亲和力和结合动力学。简单的蛋白质固定技术和易于操作的仪器设备,令上述方法能够让任何人(本科生到宇航员,高级化学家到业余科学家)在短短几分钟的培训时间里轻松领悟。

Affinité技术已被验证可用于小型治疗药物的筛选。在该项筛选方案中,将CD36的his-tagged细胞外结构域通过Affinité的金属-NTA表面化学性表达和固定在PR芯片上。封闭表面以后,在临床前试验环境中通过滴定小分子来确定药物-受体之间的KD。

3.3 分化抗原32/配体

CD36/小分子配体的量效曲线

上图为CD36相对于不同小分子配体的量效曲线,只要将数据点拟合到Langmuir等温线上即可确定小分子配体/受体的KD值。

关键实验步骤

Affinité的肽SPR芯片

Affinité的NTA肽SPR芯片

 his-tag CD36 的固定

PBS 1×pH 7.4缓冲液


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