继显微成像小课堂后，锘海光片技术小课堂也正式开课了，在以后的时间里我们会介绍光片显微镜的一些关键概念和成功应用。我们会持续推广科普新的成像技术，以更好地服务广大生命科学工作者。

光片显微镜的原理

光片显微镜的基本结构是结合了两条相互正交的不同光路，一条用于快速宽视场的检测，另一条通过一片薄光片用于照明。一般来说，光片处于检测路径的焦平面上，光片的束腰处于视野的中心（图1-1）。

图1-1 照明与检测物镜相互正交，样品置于两个物镜焦平面的相交处，样品的其中一小片会被一片薄薄的激光光片所照亮。从图中的上方往下看，光片束腰应在视野的中心位置且与检测路径的焦平面完全重合。

光片照明

选择平面照明显微镜（Selective Plane Illumination Microscopy, SPIM）的特殊结构解决了单镜头结构的两条基本限制：

(1) 在低数值孔径（NA）的物镜中获得很薄的光学切面是非常困难的；

(2) 在对样品的单个区域进行成像时整个样品都处于被激光照亮的状态，这会增加数倍荧光漂白和光毒性的可能：在获取样品的N个平面信息的同时，每个平面都在激光下曝光了N次（图1-2A）。

相比之下，在SPIM中，只有检测物镜的焦平面被选择性地