SmartBatch+介绍

SmartBatch⁺主动式组织透明化及染色一体机是基于Lifecanvas公司迭代研发的Clear⁺透明化系统迭代设计而成，高度融合原有一代主动式组织透明化SmartClear系统和主动式免疫标记SmartLabel系统所有功能，是一台功能高度集约、高通量的快速主动式透明化染色一体化设备。现在，您可以在一天内实现一次性12个小鼠脑样本的透明化或免疫标记！经过交联试剂固定后，利用 SmartBatch⁺ 一天即可完成对小鼠整脑的主动式脱脂。这种速度的提高也适用于大鼠整脑，约 4 天即可实现主动式脱脂。

作为CLARITY方法改良版本，新一代SHIELD（Nat Biotechnol，2018）固定方法与SmartBatch⁺系统方法高效结合，可在所有的组织处理过程中良好地保护荧光蛋白信号、抗原的分子和物理结构；同时将主动透明化与迭代研发的Clear+透明化系统相结合，可在一天内实现组织光学透明且无任何形变（既不膨胀亦不收缩），Clear+透明化系统也是迄今为止能保留样本原有形态的组织透明化技术；基于专利的eFLASH技术（bioRxiv，2019），有效结合了SWITCH（Cell，2015）和Stochastic Electrotransport（PNAS，2015）方法，使得SmartBatch⁺系统在免疫标记模式下能够对整个器官从表面到核心实现快速、统一、均匀的染色，且能有效节省抗体及染料的使用量。

特色&亮点：

• 一体化、多功能：SmartBatch⁺组织透明化和免疫标记模式切换只需简单更换缓冲液。

• 快速、均匀标记：系统使用eFLASH专利技术，将SWITCH开关效应与SE随机电泳技术相结合，实现均一标记完整组织。

• 经济、高效：SmartBatch⁺针对小鼠整脑尺寸的样本，仅需使用4-20μg/每个样本的抗体量，<12分钟/每个样本的手动操作时间。

• 高通量：主动透明化或标记，每批高达12个完整的小鼠脑或2个完整的大鼠脑及同等尺寸的样本。

• 光片成像的理想选择：SmartBatch⁺结合SHIELD固定，在保护组织DNA/RNA/内源性蛋白质结构、荧光信号、抗原性、降低自发荧光等方面表现出更好的性能。

组织透明化

Clear⁺组织透明化方法与电泳技术相结合，旋转电场将驱动带电的SDS胶束到样品中，以实现快速、均匀地脱脂。Clear⁺是目前已知的在透明化后不会改变样品形态的技术。SmartBatch⁺能够与不同的组织类型和完整的大样本兼容，仅需几分钟的设置便能在1天内完成透明化。

免疫标记

新公布的专利SE随机电泳技术，可有效避免抗体在扩散过程中出现仅停留在样品表面附着的情况，能够实现样品整体均匀标记；SmartBatch⁺在免疫标记过程中使用的抗体量比 iDISCO和CUBIC等被动透明化方法要少一个数量级。

目前，我们已经验证并优化多种抗体，覆盖与神经科学、肿瘤、发育和疾病相关的热门靶点。

优化组织处理流程：

1. SHIELD固定

2. Smart Batch⁺高通量主动式组织透明化

3. Smart Batch⁺高通量主动式免疫染色标记

4. 折射率匹配实现样本光学透明

5. LS18 Plus快速高分辨光片显微成像

6. 专业的三维图像处理及分析

参考文献

Murray E, Cho JH, Goodwin D, et al. Simple, Scalable Proteomic Imaging for High-Dimensional Profiling of Intact Systems. Cell. 2015;163(6):1500-1514.

Kim SY, Cho JH, Murray E, et al. Stochastic electrotransport selectively enhances the transport of highly electromobile molecules. Proc Natl Acad Sci U S A. 2015;112(46):E6274-E6283.

Park YG, Sohn CH, Chen R, et al. Protection of tissue physicochemical properties using polyfunctional crosslinkers. Nat Biotechnol. 2018;10.1038

Yun D H, Park Y G, Cho J H, et al. Ultrafast immunostaining of organ-scale tissues for scalable proteomic phenotyping. bioRxiv. 2019;660373.

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